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高速动态扫描光片荧光显微镜技术简介

光片显微成像是一种先进的三维显微成像技术,能够对大体积样本进行快速、深层次层析扫描、3D动态成像,满足科研人员对整体组织的生物学状态的研究的需求。光片显微成像技术解决传统的共聚焦、双光子成像技术只能对局部组织进行观察的缺陷,同时也避免连续切片法导致样品扭曲变形。

光片显微镜的优势如下:1. 光片照明技术具有光学切片功能,只激发焦平面的样品,提高了图像和背景的信噪比和轴向分辨率;2. 与传统的荧光照明技术相比,光毒性可降低20-100倍。可以在更接近生理状态的条件下,对活体生物样品进行长时间的三维成像;3.相对于共聚焦和双光子显微镜点扫描成像,光片显微镜进行面成像,大大提高了成像速度和图像的信噪比。共聚焦需要几分钟甚至几小时才能拍完的样品,用光片显微镜只需要几秒到几分钟。因此,光片显微镜也特别适合用于大样品成像。

借助于光片显微镜,脑科学可应用于全脑神经、血管等结构三维高精度成像,用于神经退行性疾病、脑栓塞等研究;神经科学可以研究神经元神经传导途径及修复再生能力;呼吸科学可以用于呼吸系统致病及肺损伤机制、免疫应答及药物筛选研究;肿瘤学可以用于肿瘤微环境,转移,侵袭及药物筛选;免疫学科也可以更完整的研究淋巴系统的发育过程;骨科学可以用于骨骼修复与骨再生相关研究;发育科学可以用于研究模型动物各个阶段的组织与器官的发育和功能。

高速动态扫描光片荧光显微镜(FSlight)是一种全新的光片显微系统,采用独特的动态锥光扫描系统,不同于传统光片所使用的位移台移动模式,样品在采集中静止,光片自行移动,采集过程中自动高速追焦,独有动态光补偿技术,减少阴影干扰。FSLight轴向分辨率可达2μm,光腰宽度可达1cm,最大可支持5cm样品成像。对于透明样品,最大单次扫描厚度1cm,并且仅需3分钟即可完成扫描。

应用案例:

  1. 脑科学——脑神经(左),脑血管(右)

    2. 神经科学——脑神经丝(左),肺神经(右)

  1. 呼吸科学——全肺(左),肺神经丝(右)

  1. 肿瘤学——肿瘤组织(左),肿瘤细胞(右)

  1. 骨科学

  1. 发育科学——小鼠胚胎(左),附睾(右)

一、样品适用范围

1.透明化组织样品:厚切片、小鼠大脑、胚胎、器官、球状体、成年斑马鱼等

2.透明的模式生物:斑马鱼、线虫、拟南芥等

二、样品尺寸要求:? 3cm x3cm x3cm,最大5cm x5cm x5cm

三、荧光通道:? 405nm488nm561nm647nm四通道

四、透明化方法

1.CLARITY、CUBICFRUIT等水性透明化方法

2.uDISCO、iDISCOPEGASOS等有机溶剂透明化方法。

3.可匹配1.32~1.58 折射率

五、上样

1.管式上样器: 支持<1cm的玻璃、塑料管

2.支架上样器: 支持3 cm及以上较重的样品

3.粘粘基座: 可使用502等粘粘样品,常用于琼脂包埋样品

4.夹持式上样器: 可直接加持样品,适合较硬的物体

       原文标题 : 高速动态扫描光片荧光显微镜技术简介

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